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黛龙素水溶液浓度的定量分析
黛龙素水溶液浓度的定量分析
        黛龙素水溶液浓度的测定,可以采用光电比色法。由于黛龙素中的胍基会使四溴荧光素(Eosin)由橙色变为粉红色。故可以利用四溴荧光素(又称“曙红” Eosin)溶液作为指示剂,进行黛龙素水溶液浓度的定量分析。
 
一、所需试剂:
          蒸馏水
          盐酸  0.1N
          四溴荧光素(Eosin-H)指示剂  0.05%
          甘氨酸 (Glyzin)  NH3CH2COOH
          氯化钠 NaCl

二、溶液的配制:
        1. 黛龙素标准溶液:为了制订标准曲线,需配制浓度为0~10mg/L的系列黛龙素标准溶液。其浓度分别为 0ppm, 0.5ppm,  1ppm, 3ppm, 5ppm, 7ppm, 10ppm 等最少七个标准溶液。
        2. 指示剂溶液的配制:将50毫克四溴荧光素(Eosin)在100毫升的量瓶中以蒸馏水溶解。
        3. 缓冲溶液配制:
         首先将7.57克的甘氨酸和5.65克的氯化钠溶解于一升水中 在一个1升的量瓶中加入925毫升配制好的甘氨酸溶液,加0.1N的盐酸至1升,控制PH值为3.5。

三、测量:
(一)绘制标准曲线:
        1. 利用不同浓度的黛龙素标准溶液各10毫升加入1毫升的四溴荧光素(Eosin)溶液和10毫升的甘氨酸缓冲液,混合均匀后,静置5~10分钟。然后在10分钟内用光电比色计进行测量。
        2. 测量在535微米波长下进行。
        3. 绘制标准曲线:每个溶液需进行三次测量后,取平均值,以黛龙素浓度为横坐标,透光率为纵坐标作图。若四溴荧光素(Eosin)溶液重新配制,则需制作新的标准曲线。
(二)样品的测量:
        1. 待测样品的浓度需配制在0.2~10mg/L范围内。若所需测量的样品,在此范围之外,则需进行稀释或浓缩。然后根据稀释或浓缩的系数K进行计算实际浓度。
        2. 黛龙素的浓度是通过试样和空白试样间透光率的差来确定的。
 若试样进行过预处理,则经过必须考虑稀释或浓缩的倍数:
          Cr = Cm• K
         Cr 为实际浓度
         Cm 为测量浓度
         K 为系数:当样品被稀释时 K>1 当样品被浓缩时 K<1